注冊干貨|什么情況下需要補充申請？

第十一條   變更原藥品注冊批準證明文件及其附件所載明的事項或者內容的，申請人應當按照規(guī)定，參照相關技術指導原則，對藥品變更進行充分研究和驗證，充分評估變更可能對藥品安全性、有效性和質量可控性的影響，按照變更程序提出補充申請、備案或者報告。

第二十九條   藥物臨床試驗期間，發(fā)生藥物臨床試驗方案變更、非臨床或者藥學的變化或者有新發(fā)現的，申辦者應當按照規(guī)定，參照相關技術指導原則，充分評估對受試者安全的影響。

第三十一條   藥物臨床試驗被責令暫停后，申辦者擬繼續(xù)開展藥物臨床試驗的，應當在完成整改后提出恢復藥物臨床試驗的補充申請，經審查同意后方可繼續(xù)開展藥物臨床試驗。藥物臨床試驗暫停時間滿三年且未申請并獲準恢復藥物臨床試驗的，該藥物臨床試驗許可自行失效 。

第六十六條   對附條件批準的藥品，持有人應當在藥品上市后采取相應的風險管理措施，并在規(guī)定期限內按照要求完成藥物臨床試驗等相關研究，以補充申請方式申報。                                                                                                                                                

背景：

1. I、II 期臨床用的是雜交瘤（Hybridoma）細胞株，產量低；II期結束后，變更為CHO細胞株，細胞表達量提高10倍；相應地，主細胞庫、工作細胞庫都變了；

2. 工藝變更；生產規(guī)模變大；生產地點變化；

3. 分析方法變更，采用靈敏度更高、分辨率更高的方法；如下表，

解釋變更前后的差異

SEC-HPLC單分離柱、雙分離柱圖

采用SEC-HPLC 雙分離柱，對變更前、變更后樣品進行檢驗，發(fā)現了兩者的差異。變更后的樣品多了雜峰，見下圖。把該雜峰分離出來，進行鑒定。

采用CEX-HPLC進行純度分析，發(fā)現了更大的差異。

采用唾液酸酶切后，檢驗的單克隆抗體是相同的。因為早期使用的雜交瘤細胞株，與CHO相比，產品唾液酸含量非常高。

該單抗可能存在27種異構體。

N端谷氨酰胺（Q）環(huán)化形成焦谷氨酸鹽(pE)，造成單抗電荷異質性;

C端賴氨酸（K）不均一，正常情況下可以被羧肽酶切除。然而，這種切除是不完全的，通常會導致一條重鏈或兩條重鏈上還有賴氨酸殘基修飾。而當細胞內的羧肽酶水平較高時，兩條重鏈上則沒有賴氨酸殘基修飾。這便是C末端賴氨酸不均一性，也稱為k0、k1、k2。

唾液酸引起的三種電荷可能性。

對于離子交換高效液相（CEX-HPLC），流動相的pH選擇非常關鍵，所以應開發(fā)合適pH的離子交換高效液相方法。并且，繼續(xù)分析有無二硫鍵錯配的異構體。

可比性研究

表1 可比性研究分類分級

表2 在關鍵臨床研究過程中或之后，發(fā)生的工藝變更及擬定可比性研究

^a分類AB C D E的定義見表1；

^b分類B包括的僅是放行需要的活性檢測試驗；

表3 單抗工藝變更的案例，以及證明可比性進行的PK-PD研究^a

^a N/A，not applicable，不適用;

^b進行CDC、ADCC和受體結合ELISA試驗;

^c進行活性試驗;

^d進行FcgRs、FcRn、ADCC試驗;

該案例在美國FDA的申報：變更前的3-5批與變更后的3-5批，進行頭對頭（head to head）的可比性研究。試驗結果滿足可接受標準，且沒有發(fā)現新物質產生，僅在動物水平進行橋接研究，未進行人體橋接研究，直接進入臨床Ⅲ期試驗關鍵臨床研究。

該案例在歐洲EMA的申報：更換細胞株就是新產品，不接受可比性研究。